pcr检查是什么意思,什么是PCR检测?他的原理是什么?需要什么材料?
PCR检查的全称是聚合酶链反应检测,是一种DNA层面的检查。简单来说就是复制扩增检测对象的DNA用来检测鉴别感染的病原菌种类。
当人体感染病原菌后,如果病原菌在体内存量很少,常规病原菌检测方法检测出相应病原菌的难度会较大,概率很小,会影响临床上对疾病的诊断及治疗。聚合酶链反应检测就是使用聚合酶将提取出的DNA进行反应延长,增加其长度及数量,直到临床上可通过这些产出的DNA来检测出病原菌。
PCR检查尽管比较先进,但是费用也相对较高。
什么是PCR检测?他的原理是什么?需要什么材料?
PCR(聚合酶链反应):类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。
基本原理:PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性主要依赖于和靶序列两端互补的寡核苷酸引物,它由变性——复性——延伸三个基本反应步骤构成。所需材料: 模板DNA 正二价镁离子 引物 反应缓冲液 TAQDNA聚合酶 拓展回答: 反应特点 特异性强。PCR反应的特异性决定因素为: ①引物与模板DNA特异正确的结合。②碱基配对原则。③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性。④靶基因的特异性与保守性。灵敏度高。PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12)量级的起始待测模板扩增到微克(μg=-6)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中最小检出率为3个细菌。简便、快速。PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。纯度要求低。不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活组织等DNA扩增检测。