细胞融合的基本原理和方法(细胞融合的基本原理和方法)
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1、病毒诱导助融:
细胞融合在自然界是存在的,细胞融合研究首先也是基于自发的细胞融合,1957年,冈田善雄意外发现仙台病毒,能诱导悬液中艾氏腹细胞融合,然后Harris、Kada等用于诱导种间细胞融合,获得成功。
2、化学助融:
1972年,卡尔森首先用硝酸钠进行烟草两个种的细胞原生质体的融合,1974年Kao等首先发现聚乙二醇能诱导植物细胞原生质体融合产生杂交细胞。1975年Pentecorvo,发现聚乙二醇亦能帮助哺乳类动物细胞的融合,1976年Davidson更进一步证实这一结果,并且认为其具有简单快速、高效率等优点。因而,1975年之后聚乙二醇就逐渐取代了仙台病毒.
3:电融合法:
电融合法是70年代未期和80年代初期发展起来的一种新的细胞融合方法。Senda在1970年首先应用电脉冲,通过微电极在显微镜下使植物细胞融合,奠定电融合技术基础。
4、激光诱导卵细胞融合:
激光诱导卵细胞融合是最新的细胞融合方法,该法为张闻迪等人首先应用,他们利用激光微束的单色性、高功率密度、短脉宽和极小的作用范围等特点。对泥鳅受精卵进行融合试验,获得成功,且融合后的细胞可存活发育,经卵裂期、囊胚期、原肠期、孵化期、直至幼鱼。整个过程可通过显微镜观察,还可同时由电视摄象监视器观察和进行照相记录。.
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